1、試劑配制及保存 緩沖液：取1包緩沖劑加1000mL蒸餾水或純凈水，攪拌溶解制成磷酸緩沖液，室溫保存。 顯色劑：取1瓶顯色劑加25mL緩沖液溶解，使用時(shí)取50μL，4℃冰箱保存。 底 物：取1瓶底物加10mL蒸餾水或純凈水溶解，使用時(shí)取50μL，4℃冰箱保存。 膽堿酯酶：酶制劑（丁酰膽堿酯酶）無需配制，直接取用50μL，4℃冰箱保存。

2、樣品提取 取2g果蔬樣品（塊莖類取4g）剪成1cm左右見方碎片，放入小燒杯（或取樣瓶）中；加入20mL緩沖液，振蕩1~2min，倒出提取液，靜置2min待測(cè)。

3、測(cè)試 對(duì)照測(cè)試：于專用反應(yīng)瓶中加入3mL緩沖液，再分別加入50μL顯色劑和酶液，混勻，37℃下放置30 min后加入50μL底物，搖勻并立即倒入比色杯中，放入測(cè)試通道，按儀器“對(duì)照”鍵測(cè)試3min的吸光度變化值ΔΑ0 . 樣品測(cè)試：于專用反應(yīng)瓶中加入3mL待測(cè)樣品液，再分別加入50μL顯色劑和酶液，混勻，37℃下放置30 min后加入50μL底物，搖勻并立即倒入比色杯中，放入測(cè)試通道，按儀器“樣品”鍵，測(cè)試3min的吸光度變化值ΔΑt . 結(jié)果判定： ◇ 以分光光度計(jì)測(cè)試時(shí)，按以下表達(dá)式計(jì)算出抑制率： 抑制率(%)=[(ΔΑ0－ΔΑt )/ΔΑ0]×100 ◇ 以農(nóng)殘檢測(cè)儀檢測(cè)時(shí)其抑制率一般可自動(dòng)計(jì)算。若樣品抑制率≥70%，表示被測(cè)果蔬農(nóng)殘超標(biāo)，為陽(yáng)性結(jié)果。陽(yáng)性結(jié)果的樣品需做2次以上重復(fù)檢測(cè)，多次檢測(cè)仍呈陽(yáng)性需用氣相色譜等儀器做進(jìn)一步確認(rèn)。 操作提示：在加底物的環(huán)節(jié)中，可預(yù)先將底物加入比色杯，待靜置時(shí)間一到，馬上將反應(yīng)瓶中的反應(yīng)液倒入已經(jīng)加有底物的比色杯，并迅速放入測(cè)試通道進(jìn)行測(cè)試。這樣可以減少同時(shí)檢測(cè)多個(gè)樣品時(shí)因加底物時(shí)間過長(zhǎng)而造成的誤差。

4、注意事項(xiàng) 酶活性要求：本試劑盒中酶試劑正?；钚驭0=0.4~0.8，符合NY/T 448-2001方法的要求。 保存：試劑盒應(yīng)保存于4℃冰箱，保質(zhì)期12個(gè)月。 使用：任何試劑使用時(shí)，用一瓶打開一瓶，用完后才使用新的，防止變質(zhì)。 器具專用原則：任何用于移液的器具和容器都應(yīng)各自貼上標(biāo)簽，單獨(dú)使用，以免交叉污染。 試劑只出不入原則：測(cè)試時(shí)，從任何試劑瓶吸出的試劑，禁止再次注射回試劑瓶。 環(huán)境溫度對(duì)測(cè)試的影響：當(dāng)環(huán)境溫度過低時(shí)（一般低于20℃），測(cè)試時(shí)需作必要保溫措施。