【用途】 用于肺、腎、脾、淋巴結(jié)、扁桃體、血清等樣 品和細(xì)胞培養(yǎng)液中豬瘟病毒(CSFV)的核酸檢測(cè)。
【檢測(cè)原理】 利用離心柱內(nèi)玻璃纖維濾膜提取樣品病原 RNA,在高效反轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以RNA為模板, 以引物為起點(diǎn)合成與RNA模板互補(bǔ)的cDNA鏈。 在熱啟動(dòng)Taq酶的作用下,經(jīng)高溫變性、中溫退火 及延伸的循環(huán)多次后,使擴(kuò)增 DNA 片段放大了數(shù) 百萬倍。經(jīng)熒光素標(biāo)記的探針與擴(kuò)增的DNA雜交, 利用Taq 聚合酶的 5'→3'外切活性,使熒光探針的 報(bào)告基團(tuán)與淬滅基團(tuán)分離,發(fā)出特異性熒光信號(hào), 利用熒光 PCR 儀檢測(cè)特異性熒光信號(hào),根據(jù)樣品 Ct 值的大小及擴(kuò)增曲線的形成情況判定結(jié)果。 【需要自備的物品】
1.儀器:渦旋震蕩器、離心機(jī)、熒光PCR擴(kuò)增儀、-20 ℃冰箱、組織研磨器、可調(diào)移液器。
2.耗材:眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、經(jīng)焦碳酸二 乙酯(DEPC)水處理的滅菌1.5mL離心管和吸頭。
【操作步驟】 詳見說明書
【規(guī)格】50份/盒
【保存及有效期】于-20℃避光保存,有效期為12 個(gè)月。