用途 :本試劑盒采用實時熒光RT-PCR方法檢測偶蹄動物水泡皮、水泡液及OP液中的口蹄疫病毒 (FMDV)的RNA。適用于FMDV的診斷、檢測和流行病學(xué)調(diào)查。 原理 利用離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜提取樣品總RNA,在高效反轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以RNA為模板,以 引物為起點合成與RNA模板互補的cDNA鏈。在熱啟動Taq 酶的作用下,經(jīng)高溫變性、中溫退火 及延伸的循環(huán),使特異DNA片段的拷貝數(shù)放大一倍,經(jīng)熒光素標記的探針與擴增的DNA雜交,利 用Taq 聚合酶的5'→3'外切活性,使熒光探針的報告基團與淬滅基團分離,發(fā)出特異性熒光信號,利 用熒光PCR儀檢測特異性熒光信號,根據(jù)樣品Ct值的大小及擴增曲線的形成情況判定結(jié)果。
【保存及有效期】室溫避光保存 本產(chǎn)品有效期為12個月。
需要自備的物品 1.儀器:分析天平、離心機、熒光PCR擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 μL、20 μL、200 μL、1000 μL)。
2.耗材:熒光PCR專用反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水 處理的滅菌離心管、吸頭(10 μL、200 μL、1000 μL)、滅菌雙蒸水。
注意事項:詳見說明書