【用途】 豬繁殖與呼吸綜合征病毒(PRRSV)變異株反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng) (RT-PCR)檢測試劑盒,用于檢測豬血清和組織 中的PRRSV變異株,適用于 PRRSV變異株的檢測、診斷 和流行病學(xué)調(diào)查。
【原理】 提取樣品 RNA,在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下,以 RNA 為模板,以引物為起點合成與RNA模板互 補的cDNA鏈。在TaqDNA聚合酶的作用下,經(jīng) 高溫變性、低溫退火、中溫延伸的循環(huán),使特異 DNA 片段的拷貝數(shù)放大一倍。經(jīng)過35次循環(huán), 最終使擴(kuò)增 DNA 片段放大了數(shù)百萬倍。將擴(kuò)增 DNA片段進(jìn)行電泳,經(jīng)染色后,在紫外燈照射下, 肉眼可見到DNA片段的擴(kuò)增帶。
【試劑盒組成】 詳見說明書
【需要自備的器材】
1.試劑:核酸提取試劑、瓊脂糖、電泳試劑等。
2.儀器:分析天平、離心機、PCR擴(kuò)增儀、電泳 儀、電泳槽、紫外凝膠成像儀(或紫外分析儀)、 微波爐、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 μL、20 μL、 200 μL、1000 μL)。
3.耗材:稱量紙、20 mL一次性注射器、500 mL 量筒、500 mL錐形瓶、經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC) 水處理的滅菌1.5mL離心管和吸頭(10 μL、200 μL、1000 μL)、滅菌雙蒸水。
【使用注意事項】詳見說明書
【樣品采集】 病死或撲殺的豬,取肺、扁桃體和腦等組織; 待檢活豬,用注射器取血5 mL。2~8 ℃保存,送 實驗室檢測。(要求送檢病料新鮮,嚴(yán)禁反復(fù)凍融 病料。)
【RT-PCR操作】 詳見說明書
【規(guī)格】50份/盒
【保存及有效期】0.2 mL薄壁PCR管可存放于室 溫,其他試劑于-20℃以下保存,有效期為 12 個 月。